1、样本本身，这个是最主要因素 ；
2、裂解不充分；
3、清洗不充分。
在三个因素里面，清洗不充分是最小的影响因素，通常磁珠吸附DNA之后，吸附的盐分比较少，逐步清洗后会稀释更少了。剩下的两个因素，血液样本本身的问题是真正的主要原因，但是样本没得选，因此只能在裂解步骤找办法。
分析大家要知道一个样本260:280还不错，有几种情况会导致260:230偏低：
第一种，蛋白酶K活性下降，导致260:230偏低。
第二种，血样的体积选择不合适。
第三种，就是裂解的过程中裂解或者振荡不充分，我们会针对这三种情况分别阐述。
因为蛋白酶K放在冰箱里面经常会拿进拿出，实验员往往也会用完后忘在桌上一两个小时后才记得放回冰箱，或者很长时间后偷偷放回冰箱，这种情况经常遇到，大家一定要注意这点。
再有一个，振荡不充分，也会导致比值下降。如果出现260:230比值偏低，我们在排除蛋白酶K活性因素，上样量是否偏大，如果说我们取样量由200uL不小心加至250uL，那么我们的260:230比值必定偏低。第二个裂解时间是否充足、裂解过程中是否充分振荡。若我们实验时间较为充裕，建议大家可适当延长裂解时间（适当延长10~20min），如此操作可规避取样误差引起的纯度降低现象。同时在裂解期间建议可采用振荡仪适当振荡混匀样品。若选用英芮诚的96孔板加热振荡仪：动态加热裂解，可大幅度提高工作效率。因为动态加热裂解的效果会较传统的水浴锅裂解好很多。
清洗不充分（影响力度较小）；
取样误差问题，建议采用200uL吸头取样；
蛋白酶k活性降低，260:230比值低，核酸浓度高低不均一；
样品本身问题。
振荡时间不足，导致裂解不充分。
建议采用英芮诚96孔板加热振荡仪，动态加热裂解。
